应用

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2023-10-20

应用
目的制备负载低聚倍半硅氧?双氯芬酸?polyhedral oligomeric silsesquioxane-diclofenac sodium,POSS-DS)纳米颗粒的甲基丙烯酰透明质酸(hyaluronic acid methacrylate,HAMA)水凝胶微?对其进行表征并探究体内外生物学特性。方法以八巯基POSS(sulfhydryl POSS,POSS-SH)为纳米构筑平?采用“点击化学”法将聚二乙醇和DS以化学键接枝其上,构建功能化纳米颗粒POSS-DS,并使用核磁共振波谱仪分析成分,透射电镜对形貌进行表征。为实现药物长期缓慢释放,将POSS-DS包载于HAMA?通过微流控技术制备多功能水凝胶微?即HAMA@POSS-DS;利用光镜及扫描电镜对其形态进行表?观察体外降解及药物释放效?采用细胞计数试剂?(cell counting kit 8,CCK-8)试剂盒及?死染色法检测对软骨细胞增殖的影哌并构建软骨细胞炎症模型后用HAMA@POSS-DS进行处理,通过免疫荧光染色及实时荧光定量PCR检测相关炎症指?即Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚?aggrecan,AGG)、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、解聚蛋白样金属蛋白?(recombinant A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin 5,Adamts5)、速激?(recombinant tachykinin precursor 1,TAC1),以正常培养软骨细胞及未作处理的炎症模型分别作为对照组及空白组,进一步评估其抗炎性能。最?通过构建大鼠膝关节骨关节炎模?经X线片及Micro-CT检?验证HAMA@POSS-DS对骨关节炎的治疗效果。结果POSS-DS纳米颗粒总体粒径均一,?00 nm。HAMA@POSSDS为不透明球体,粒径?00μm,呈多孔结枃体外降解周期??期间缓释负载的POSS-DS。CCK-8试剂盒及?死染色法检测显示HAMA@POSS-DS无明显细胞毒?且其释放的POSS-DS对细胞增殖有促进作用(P<0.05)。软骨细胞抗炎实验中,HAMA@POSS-DS组Ⅱ型胶原mRNA相对表达量高于对照组和空白组、AGG mRNA相对表达量高于空白组、MMP-13、Adamts5以及TAC1 mRNA相对表达量低于空白组,上述差异均有统计学意?P<0.05)。体内实验显示术后大鼠骨关节炎关节间隙宽度减?但HAMA@POSS-DS可延缓关节间隙变窄进?并改善关节周围骨赘增生情?P<0.05)。结论HAMA@POSS-DS可有效改善局部炎症微环境,并显著促进软骨细胞增?有利于促进骨关节炎的软骨再生与修复?..

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2023-10-19

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