飞纳 Pharos-STEM 在细胞生物学和病理学的应�?/p>

一直以来，透射电镜（TEM）是观察和研究超微结构的首选工具，可用于观察整个细胞结构，包括细胞壁、细胞膜、细胞核和各种细胞器的变化，以及外源物质与细胞之间的关系等。不仅有助于许多重要细胞器的结构和功能的研究，而且有助于解剖病理学、血液学和微生物学等学科的病理诊断研究、�/p>

扫描透射（STEM）模式作� TEM 的附加配件，可以显著提高生物样品的衬度，特别是未染色的组织切片。应对此类生物样品，TEM 操作人员通常也会选择相对较低的加速电压（80kV）来增加图像的衬度，并提高清晰度。但是由于其操作的复杂性，在对细胞生物学和病理学的超微结构的研究中，还没有被广泛应用（除专业的电镜中心外）、�/p>

飞纳台式场发射扫描电镜，体积小巧，具有低电压成像的优势，配备了新型的扫描透射（STEM）探测器后，可以结合扫描电镜和透射电镜的功能特点，� 15kV 的低加速电压下，就可以获得高分辨率的扫描透射成像。在观测电子束敏感的生物样品时，可以获得高成像质量图片、�/p>

以下为大家分享生物组织样品的制样方法以及 4 个使� Pharos-STEM 拍摄的案例。（加速电� 15kV，工作距� 8.9mm（�/p>

具体过程如下：使� 2.5% 的戊二醇溶液（溶解于 PH 值为 7.4 � 0.1M 碳酸钠缓冲液中）进行固定，固定完成后，组织样品在碳酸钠缓冲液中清� 1-2 天。这个过程具体包括使� 2% 四氧化饿清洗 4h�?% 醋酸铀清洗 1h，醋酸钠清洗 1h；然后使用梯度乙醇和丙酮进行脱水处理；接着按照标准配方使用低粘度环氧树� Spurr 进行包埋，将树脂� 70� 下固� 15h；最后使用超微切片机制备 70nm 厚的组织切片，将组织切片安装� 300 目的铜网上。接下来将具有样品的铜网放入 Pharos-STEM 中进行观测，结果如下、�/p>

案例一：被肾小囊（Bowman's capsule）包裹的正常肾小琂�/strong>

�? 小鼠肾标本样品（肾小球和临近的肾血管）� STEM 图。红色箭头处可以看到含有红细胞的肾小球毛细血管，毛细血管被肾小球基底膜和足细胞的足突包围、�/p>

�? 为被肾小囊（Bowman's capsule）包裹的正常肾小球的超微结构� STEM 图显示了正常肾小球毛细血管袢和肾小球系膜，与 TEM 下的微观图像类似。STEM 图中的红色箭头处清晰显示了肾小球基底膜、系膜基质、系膜胞质、足细胞足突的细节以及与基底膜毗邻的裂孔结构。STEM 图像显示了高分辨的超微结构，图像衬度明显，可以快速捕捉到极小的细胞变化，并快速分析感兴趣部位的微观结构、�/p>

案例二：正常的小鼠胰腺腺泡细胝�/strong>

� 2 正常的小鼠胰腺腺泡细胞结� STEM 图。图中显示了酶原颗粒（Z）、液泡、线粒体（M）、腺泡腔（L）和粗面内质网（R）。上图为胰腺星形细胞，下图为内质网的精细结构、�/p>

案例三：人类脑肿瘤组细�/strong>

� 3 人类脑肿瘤组� STEM 图。图中清晰显示了细胞的超微结构特征，髓鞘轴突、线粒体和嵴结构（M）、包含细胞间质纤维和囊泡的星形细胞结构（红色箭头处）。图中可以清晰观测到细胞结构和细胞器之间的关系、�/p>

�? 培养的全能干细胞� STEM 图。晶状体上皮细胞内有大量的细胞质器，如线粒体和卵圆形细胞核。均质的细胞外观与早期细胞分化阶段的细胞相似（数据来� ROR1e LECs）。图中可以清晰看到晶状体的微结构，包括靠近组织周围的晶状体上皮细胞，以及与之相邻的具有杆状细胞核的未成熟的晶状体纤维细胞，具有圆形细胞核的细胞和晶状体纤维细胞类似、�/p>

总结

通过以上 4 个案例，可以看出，使用配� STEM 探测器的飞纳台式场发射扫描电镜，在观察生物类样品时，在较低的加速电压下，几分钟内便可以获得高衬度、高分辨图像。如您对此产品感兴趣，欢迎联系我们、�/p>

参考文�?/strong>

1. Cohen Hyams T; Mam K; Killingsworth MC, 2020, ‘Scanning electron microscopy as a new tool for diagnostic pathology and cell biology�? Micron, vol. 130, pp. 102797 -102797,

2. C. U., Devi, M. Masona, T. Cohen Hyams, M. C. Killingsworth, D. G. Harmana V. Gnanasambandapillai, L. Liyanage and M. D. O’Connor, ‘A simplified method for producing human lens epithelial cells and light-focusing micro-lenses from pluripotent stem cells�? Experimental Eye Research (2020)