手机片img class="sj_xl" src="//www.znpla.com/ruishihuajia/v2images/xia.png"/>

扫一扫,手机访问

关于我们 加入收藏
400-810-0069 ?/span>3838

中国粉体网认证电话,请放心拨扒/p>

大昌华嘉科学仪器?/p>

14 平/span>白金会员

已认?/p>

拨打电话
获取底价
提交后,商家将派代表为您专人服务
立即发?/a>
当前位置9/div> 麦奇?Microtrac > 技术文竟/a>>

用FlowCam进行集群和丝状蓝藻的细胞计数:方法和案例研究

用FlowCam进行集群和丝状蓝藻的细胞计数:方法和案例研究

追踪有害藻(HAB)生镾/strong>

准确地确定集群和丝状蓝藻的细胞计数,如微囊藻和鱼腥藻是监测潜在毒性蓝藻的关键。传统的方法,包括手工显微镜检查,耗时、繁琐、容易出错、难以验证、/p>


?017?月的《有害藻类》杂志上,来自加州水资源部门的科学家描述了他们如何使用FlowCam®估计微囊藻的细胞丰度。这个技术简报解释了他们的方法,也适用于丝状蓝藻、/p>

1.png

?。集群藻?微囊?和丝状藻?Anabaena)可以使用FlowCam及其分析软件VisualSpreadsheet®枚举。每张图片下方标注菌落面?ABD) (μm2)、/span>


样品采集与制夆/span>

以下节选自Lehman et al.(2017),?014年严重干旱对旧金山河口微囊藻爆发的影响》,《有害藻?3:94-1208》,描述了他们样品的收集和制备、/p>


用Lugol溶液保存所要测定生物体积的微囊藻的两个样品(>75 μm粒径)。微囊菌落的生物体积是使用FlowCam数字成像流式细胞?Fluid imaging Technologies;Sieracki et al.?998)检测获得Area (ABD)。为了更方便地测量集群藻的生物体积,将样品分成直?lt;300 μm的馏分,并在10倍和4倍放大下检测?gt;300μm样品?倍放大下分析。基于FlowCam测量的细胞丰度结果与显微分析的结果密切相?r=0.88,p<0.01)、/p>


采用0.3m深度的全?未处?样品,测定了次地表水中浮游植物和蓝藻的生物体积和分类组成(>10 μm粒径分数)。这些样本保存在4℃,并在FlowCam数字成像流式细胞仪上保存1?小时。FlowCam安装了一个荧光触发器,可以从碎屑中分离活的浮游植?Sieracki et al.?998)。将样品置于100 mL?0分钟内通过流通池中,采用10倍放?,以此获得细胞的数字图像、/p>


计算细胞密度:集群藻籺/span>

Lehman等人使用以下方法计算了含有集群微囊藻样品的细胞密?细胞/mL)、/p>


首先,测定微囊藻菌落中单个细胞的平均面积。从VisualSpreadsheet列表文件中选择集群(?),用VisualSpreadsheet计算菌落的面?Area, ABD)除以图像中人工计数的细胞??)、/p>


2.png

?。微囊藻集群在VisualSpreadsheet软件中显示的图像。图下标注了每个集群的面?ABD) (μm2)。下面的计算中使用了绿色突出显示的菌落图像。人工计数显示,每个高亮集群从左到右分别???3?8个微囊细胞、/span>


在列?LST)文件中分离出微囊藻后,将该文件导出至Excel,作为分类总结报告。在Excel单元格中输入以下公式,计算样本的平均细胞密度:

3.PNG

计算细胞密度:丝状藻籺/span>

计算集群藻细胞密度的方法也可用于计算丝状蓝藻(包括鱼腥藻的细胞密度、/p>


为了确定单个细胞的面?ABD),将鱼腥藻丝的面?ABD)除以图像中细胞的数量、/p>


利用VisualSpreadsheet文件中的图像(?),确定Anabaena细胞的平均面?ABD)?8 μm2、/p>


在VisualSpreadsheet列表(LST)文件中筛分出鱼腥藻之后,数据被导出到Excel中,作为分类总结报告。将如下公式输入到Excel细胞中,计算丝状藻样本的细胞密度:

4.png


?。VisualSpreadsheet显示出的鱼腥藻图像。每张图片下方标注了整个丝状藻类的面?ABD) (μm2)。选取这些图像来计算单个细胞的平均面积(ABD)、/strong>


5.PNG

细胞丰度被用来追踪藻华生长。使用上述方法,FlowCam可以用来计算集群或丝状蓝藻藻华的细胞丰度、/p>


虚拟号将秒后失效

使用微信扫码拨号

为了保证隐私安全,平台已启用虚拟电话,请放心拨打(暂不支持短信)