一、样品前处理

1、所用试剁�/strong>

必须使用重蒸馏水或与之等质的水（电导率＜10μs（�/p>

1.1 双氧�?30%

1.2 甲酸�?8-100%

1.3 苯酚：须重蒸

1.4 偏重亚硫酸钠

1.5 氢氧化钠

1.6 盐酸，ρ＝1.18g/ml

1.7 水解剂：6mol/l 的HCL�?L�?g苯酚；加1g苯酚�?.3）到492mL盐酸(3.7)中，然后用水定容�?L

1.8 20种氨基酸标准�?/p>

2、标样配�?/strong>

氨基酸混合标准储备液：称取上述各氨基酸标样使用PH2.2的Load Buffer配置�?.5umol/L的储备液备用、�/p>

取氨基酸混合标准储备液与PH2.2的Load Buffer�?:9的比例配置成0.25umol/L的标准液、�/p>

3、前处理设备

1) 天平

2) 水解箠�/p>

3) 量筒

4) 无油真空泴�/p>

5) 干浴水解、浓缩仪

6) 移液箠�/p>

7) 0.45um滤膜

4、样品制备（参考欧盟饲料指�?8/64/EC （�/strong>

1) 样品的准夆�/p>

粉碎样品，通过0.5mm的筛孔。高水分的样品粉碎前必须低于50℃鼓风干燥或者冷冻干燥。高脂肪含量的样品粉碎前必须用轻质石油（3.12）脱脂、�/p>

2) 氧化

从准备好的样品中称取�?.1~1克样品，准确�?.2mg，于100 ml带螺纹盖子的瓶子中，称取的样品应该含有大�?0mg氮，水分不能超过100mg。将瓶子放于冰水浴中冷却�?℃，�?ml氧化试剂（过甲酸苯酚），用带弯头的玻璃刮勺混合。用空气密封膜将瓶子和刮勺一起密封，密封后一起放�?℃冰箱的冰水浴中，放�?6小时。之后，从冰箱中取出，加0.84克偏重亚硫酸钠（3.4）来分解过量的氧化试剂、�/p>

3) 水解

加入25毫升盐酸-苯酚溶液, 然后将反应瓶放在烘箱中，温度控制�?10摄氏度，旋松帽子（防止玻璃瓶子破裂），水�?小时。然后快速旋紧瓶塞（戴手套和护眼罩）将其继续在烘�?10摄氏度下水解23小时、�/p>

4) 加入内标并且调节pH值到2.20

当水解反应结束后，将反应瓶从烘箱中取出，并且打开瓶口（戴手套和护目镜）。冷却后用定量加样器准确加入15.00�?15毫升)正亮氨酸标准溶液，混合并且转移水解溶液到250毫升的塑料烧杯中。加入大�?25毫升柠檬酸缓冲液�?9毫升氢氧化钠水溶�?将实验烧杯放入到样品容器中用氢氧化钠水溶液将溶液调节到pH为正�?.20、�/p>

转移一部分溶液（不需要全部）�?0毫升有盖子的塑料瓶中。可以马上测定或者放入冰箱等到分析的时候测定、�/p>

二、分析方法描述（Biochrom 30+（�/strong>

氨基酸分析仪分析方法参数９�/p>

1) 色谱柱：Biochrom Na型阳离子交换树脂柱，4.6x20cm

2) 分离程序９�/p>

3) 运行时间：分析时�?5min

4) 反应单元温度�?35°C、�/p>

5) 检测波长：570nm�?40nm同时检测、�/p>

三、外标法定量

附、豆粕A分析图谱

全自动氨基酸分析�?/strong>

由具�?0年专业氨基酸分析制造经验的Biochrom公司生产、�/p>

能够出具无争议的国际和国家标准的检测报告，为您带来准确的分析结果以及和欧美接轨的技术服务的仪器�?nbsp;