编号：YYHY007910
篇名� 偶联多种单链抗体免疫纳米微粒的制备方法及鉴定
作者： 邹金� 李若� 练国� 陈少� 陈茵� 黄开�
关键词： 纳米微粒 多种单链抗体 表面修饰 方法
机构：中山大学孙逸仙纪念医院消化秐�br>摘要� 目的建立一种多单链抗体修饰氧化铁纳米微粒的方法。方法利用聚乙二�?polyethylene glycol,PEG)及羧�?COOH group)修饰的氧化铁纳米微粒(Iron Oxide Nanoparticles,IONPs),以及抗MUC4、抗CEACAM6及抗CD44v6单链抗体(Single chain antibodies,scAbs),通过EDC/Sulfo-NHS交联剂将IONPs-PEG�?种scAbs进行交联,构建IONPs-PEG-multiscAbs复合�?再利用zeta粒度仪、透射电子显微�?TEM)对IONPs-multiscAbs复合物进行表�?同时,在IONPs-PEG表面偶联荧光抗体,通过荧光强度测定其偶联效玆�再鉴定复合物的抗原识别特异性及在放�?个月�?个月后评估复合物水溶液稳定性。结果偶�?种scAbs�?IONPs-PEG-multiscAbs复合物的平均粒径�?23.6±0.5)nm,粒径分布集中,zeta电位�?-17.3±06)mV;TEM显示粒径�?0nm,荧光强度测定结果提示抗体偶联效率约为75%,细胞免疫荧光实验结果提示IONPs-PEG-multiscAbs复合物对高表达MUC4、CEACAM6及CD44v6分子的胰腺癌细胞BxPC-3具有特异性识别能�?证实该复合物具有良好的抗原识别特异�?在放�?个月�?个月�?偶联复合物的溶液分散性良�?放置6个月后平均粒径约(23.9±0.8)nm,zeta电位�?-17.6±0.4)mV,TEM拍照提示粒径�?0nm,细胞免疫荧光提示复合物抗原识别特异性良好。结论本研究利用EDC/Sulfo-NHS交联剂组�?�?种单链抗体交联到PEG和羧基修饰的IONPs表面,构建IONPs-PEG-multiscAbs复合�?该方法偶联效率高,且复合物具有粒径小、分散性好、抗原识别特异性及水溶液稳定性好的特性�