ClonePix 2高通量细胞克隆筛选系绞�/strong>

ClonePix 2高通量细胞克隆筛选系绞�/strong>全自动的筛选流程可以在更短时间内筛选更多克隆。经过已有用户证明，可以显著提高筛选效率、克隆产量，并节省时间和成本、�/span>

主要特性：

1.更短时间筛选更多克隅�/span>

2.优质图像结合智能化分析软仵�/span>

3.准确、自动化克隆挑选，避免有限稀释，

4.增加生物治疗药物细胞系的产量

创新的筛选流程更少时间筛选更多克隅�/span>

缩短细胞系和抗体开发时闳�/span>

挑取表达水平更优的细胞克隅�/span>

1.使用半固体培养基培养细胞，获得独立的单个细胞克隆

2.ClonePix 系统可以快速筛选上万个克隆

- 大大增加找到更优克隆的概玆�/span>

- 白光成像用于识别克隆位置

- 荧光成像用于定量表达水平

3.多种检测方法可逈�/span>

- 不用标记，直接检测杂交瘤分泌� IgG 或抗原特异� MAbs

- 检测加入标记的重组蛋白或表达的荧光标记蛋白

4.客观的成像分析，使用户可以准确筛选到更优表达水平的克隆，并尽可能早的排除表达水平低的干扰克隆

5.根据克隆表达水平自动排序，并准确、自动化挑取克隆，避免有限稀释的繁琐和出错几率、�/span>

满足药品监管的要汁�/span>

针对� IgG 的项目，使用不含动物源成份的试剂：CloneMedia，CloneMatrix，Recombinant CloneDetect 以及 XP media、�/span>

确保形成独立的单克隆

使用 CloneMedia 半固体培养基培养细胞，有利于增加铺板效率和形成独立单个克隆，有利于克隆识别和挑取、�/span>

1.基于多种基础培养基，针对 ClonePix 系统的应用进行专门优匕�/span>

2.适用于多种细胞，经过优化和验证的专用培养基可选：Per.C6?，CHO-s，CHO DG44，HEK，CHOK1SV，杂交瘤以及骨髓瘤细胞等

3.有标准成份，无动物源成份以及无谷氨酰胺成份等多种培养基可选，

4.使用 CloneMatrix 甲基纤维素浓缩液，用户自己配制特殊用途培养基

CloneMedia 培养基获得的克隆，使� CloneSelect Imager 成像

不同于传统的培养方法，半固体培养基的细胞铺板密度更高，并且可以保证形成独立的单个克隆，有利于下一步单克隆的挑取、�/span>

一个成熟的培养方法

使用半固体培养基培养细胞形成克隆，这种方法已经非常完善：

“EASIER TO PLATE OUT LARGE NUMBERS OF CELLS AND TO RECOVER MANY INDEPENDENT HYBRIDOMA CLONES“�/span>

A simple� single-step technique for selecting and cloning hybridomas for the production of monoclonal antibodies (J. Immun. Methods (1982) 50� 161-171)

目标蛋白检浊�/span>

使用基于荧光的方法检测分泌蛋發�/span>

荧光耦联� CloneDetect 检测试剂可以原位检测分泌表达的人、小鼠以及大鼠抗体。因为克隆本身不需要产生荧光，所以不需要对目标蛋白加入额外荧光标记分子、�/span>

1.根据实验检测要求以及表达蛋白类型，选择合适的检测试剂，比如 FITC 标记抗人检测试剁�/span>

2.加入液体检测试剂到半固体培养基

3.ClonePix 系统对克隆进行成像、分析并根据所有克隆的荧光信号水平进行排序

检测方法的选择

检测分� IgG 的单克隆抗体

高质量成像，智能化分枏�/span>

成像

1.白光和荧光成像可以用于计算克隆的大小以及荧光强度（代表目标蛋白的表达量）、�/span>

数据显示

1.软件根据克隆的荧光强度、大小等物理参数对克隆自动进行排序，得到所有克隆的 2D 柱状图表、�/span>

2.克隆的筛选和选取主要依据以下参数９�/span>

- 大小，边缘圆度以及克隆距禺�/span>

- 根据荧光强度排序

- 用户可以通过软件中设置“proximity”的值，去掉距离太近的克隅�/span>

数据追踪

1.软件自动将所有克隆的统计信息排列成表，可以随时导出想要克隆的信息

2.软件按照用户自定义的顺序挑取克隆� 96 孔板，并自动记录克隆来源、位置信息以及荧光强度等统计学参�?/span>

克隆挑取和转秺�/span>

1.用户可以根据成像数据和统计分析的结果自定�?终要挑取的克隆数目和挑取顺序

2.系统自动选择用户自定义的克隆，并将每个克隆转移到 96 孔目标微孔板，用于培养后进一步分析或克隆扩大培养

3.XP Medi a CHO Growth A 是针� CloneMedi a CHO Growth A 半固体培养基专门优化，适用于挑取克隆进一步放大培养的液体培养基，可以获得更好的挑取后生长效果、�/span>

快速筛选特异性抗体克隅�/span>

ClonePix 系统可以从融合后自动化筛选，一步找到目标杂交瘤克隆；是一个高效的自动化筛选方法、�/span>

1.筛选更多克隆——发现更多的阳性克隅�/span>

2.实验过程更加快速高效，e.g.7-10 天可以筛选到 100-500 个特异性杂交瘤克隆

3.通过避免阳性克隆的丢失以及早期排除阴性克隆，大大节省下游工作时间和成�?/span>

4.原位筛选抗原特异性或者分� IgG 杂交瘤——适用于多种类型抗原分子（� 160 KD 的复合体蛋白� 2.6 KD 的磷酸肽（�/span>

快速检测抗原特异性IgG克隆

FITC 标记 60 KD 抗原

快速从退化克隆中筛选高产克隅�/span>

一些杂交瘤细胞系在 MAb 的产量方面退化严重，或者分泌性比较差。已有用户使� ClonePix 系统从退化的克隆中成功恢复了高产克隆株、�/span>

增加生物药物细胞系的产量

ClonePix 系统相比传统方法，可以在短时间内筛选更多的克隆，能够大大增加找到稀少的高产克隆的概率。通过下面的实� (MedImmune LLC)，比较了传统的有限稀释和 ClonePix系统的有效性、�/span>

更短时间筛选更多克隅�/span>

原位荧光显示高产细胞株，早期排除不需要的克隆

在工艺进一步优化前即获得高产克� (NS/O: 4-5 g/L，CHO: 5-6 g/L)

细胞系稳定�?/span>

表达量不稳定是细胞系筛选早期阶段的主要问题。ClonePix 系统可以直观分析克隆的稳定性、�/span>

把筛选到的克隆铺到半固体培养基，4-7 天培养后，使� ClonePix 进行成像分析，比较子代克隆和亲代克隆的表达量，验证克隆稳定性。也可以培养 7-14 天后，重新对亚克隆进行筛选、�/span>

经过两轮筛选之后稳定性细胞系数据