氨基酸分析仪检测透明胶质类中的游离氨基酸

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本品为Tau、Glu、Gly、Val、Cysteine?种氨基酸配制而成的透明胶质类物质,使用Biochrom30+全自动氨基酸分析仪,对其所含的游离氨基酸组分及含量进行分析,并了解对该样品高温灭菌前后,所含氨基酸的具体影响。结果表明该未知样中氨基酸各单个氨基酸含量的浓度,及高温灭菌前后的分别见附页结果表、/p>



一、样品前处理

1、所用试剁/strong>

1.1 Loading Buffer:锂盐系统,pH 2.2

1.2 磺基水杨酸溶液:?0g磺基水杨酸溶?L纯水?/p>

1.3 乙二胺四乙酸二钠溶液:取10g EDTA-Na溶于1L纯水?/p>

1.4 0.06mol/L 盐酸:取50mL 盐酸加水稀释至10mL,混匀

1.5 5种氨基酸标准品、Cystine单标


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2、前处理设备

1) 分析天平:精度 0.0001g

2) 移液枪及枪头

3) 0.22um滤膜

4) 一次性注射器

5) 低范围pH试纸


3、样品制备(参考NY/T 1975-2010(/strong>

因样品为透明胶质类物质,且可能含有未知大分子等杂质,故需(参考NY/T 1975)进行除蛋白前处理9/p>

吸取2 mL样品?0 mL离心管或试管?准确加人2 mL磺基水杨酸溶?1.2),混匀,放置1h。准确加? mL EDTA-Na溶液(1.3)? mL盐酸溶液(1.4),混匀,离心15 min(或用0.45um的微孔滤膜过?。吸取上清液(或滤?1 mL(测定当前pH,若有需要则可加少许的Loading Buffer (1.1),使氨基酸浓度处于仪器最佳检测范围内),移液枪取上述溶?mL至一次性注射剂,过滤膜,上机待测、/p>


二、分析方法描述(Biochrom 30+(/strong>

氨基酸分析仪分析方法参数9/strong>

1) 色谱柱:Biochrom Li型阳离子交换树脂柱,4.6*20cm

2) 分离程序9/p>


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3) 运行时间:经分析时间+再生时间 168.15min

4) 反应单元温度?35°C、/p>

5) 检测波长:570nm?40nm同时检测、/p>


三、样品中氨基酸含量的计算

样品测定液氨基酸的含量按?1)计算:

Ci = Cs/As × Ai× F ················· (1)式中:

Ci ———样品测定液氨基酸i的含?单位为纳摩尔每毫?nmol/mL);

Cs ———氨基酸标准工作液氨基酸s的含?单位为纳摩尔每毫?nmol/mL);

Ai ———试样测定液氨基酸i的峰面积;

As ———氨基酸标准工作液氨基酸s的峰面积;

F ———样品稀释倍数、/p>


附:透明胶质类物质中,高温灭菌前后比较的游离氨基酸,分析图谱及做样结果:


由结果可知:高温灭菌之后的游离氨基酸含量,相较于灭菌前会有少许提升。这是由于灭菌前的样品中可能含有的少许干扰物质或杂菌,存在经过高温灭菌等的处理会被破坏,释放少许的氨基酸的可能,属合理正常现象、/p>


?. 样品A--灭菌前—Tau、Glu、Gly、Val+Cystine


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?. 样品B--灭菌后—Tau、Glu、Gly、Val+Cystine


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大昌华嘉科学仪器?/strong>

大昌华嘉仪器部专业提供分析仪器及设备,代理众多欧美先进仪器,产品范围包括:颗粒,物理,化学,生化,通用实验室的各类分析仪器以及流程仪表设备,在中国的石化,化工,制药,食品,饮料,农业科技等诸多领域拥有大量用户,具有良好的市场声誉。我们的业务逐年增加,市场不断扩大。大昌华嘉公司在中国设有多个销售,服务网点,旨在为客户提供全方位的产品和服务、/p>



全自动氨基酸分析?nbsp;


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由具?0年专业氨基酸分析制造经验的Biochrom公司生产、/p>

能够出具无争议的国际和国家标准的检测报告,为您带来准确的分析结果以及和欧美接轨的技术服务的仪器、/p>

麦奇?Microtrac 2023-09-19 | 阅读?95
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