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背景9/strong>
蛋白质组研究要得到准确可靠的结果,很大程度上取决于样品的前处理方法。保持样品的新鲜性和稳定性,即样品是否反映目标蛋白质在活体内的原始状态尤为重要。一旦样品从机体分离,调控平衡被打破,某些蛋白质或多肽将很快发生离体降解,导致蛋白质的种类、含量和修饰快速变化,使得检测到的部分蛋白质或肽段实际上是高丰度蛋白质的降解产生的片段,而不是样品中的原始蛋白质(如下图,小鼠下丘脑组织离体1-10分钟的样品发生了显著的降解)、/span>
在细胞和组织表达的蛋白质组中,发挥重要生理功能?*研究意义和价值的蛋白质通常是一些含量很小、稳定性差的低丰度蛋白质或多肽。随着蛋白质检测技术的发展,检测方法的灵敏度越来越高,也对样品前处理方法提出了更高的要求,如何在处理样品过程中保留这些蛋白质或多肽就变得越来越重要、/span>
因此,采用一种快速、有效的样品稳定方法,尽量缩短样品采集与稳定之间的间隔时间并将样品前处理(稳定)过程标准化,对于蛋白质研究具有重要意义。高质量的样品前处理有利于获得高质量的数据,进而增强分析结果的可靠性和可比性、/span>
产品描述9/span>
Stabilizor(生物样本热稳仪)为瑞典生物技术公司(Denator)潜心研发及改进而成功推出的新型?*生物样品稳定技术。该系统包含Stabilizor主机和样品卡,用于解决蛋白质离体降解的难题、/span>Stabilizor系统能快速、均匀、准确的将热量传递给样品,破坏蛋白质中的氢键,保留氨基酸链的共价肽键,即破坏蛋白质的二级及以上结构,保留一级结构的完整性。这种不可逆的失活效应将样品中的各种酶类失活,从而将蛋白质离体降解的程度降到*低。处理过程中无需添加辅助抑制试剂,也将后期分析的干扰因素降到?低、/span>
该技术起源于**的瑞 Uppsala 大学,课题组发现,由于神经肽的丰度低、半衰期短,在依 LCMS 技术研究帕金森氏症模型时其活性组分的信号难以捕获到。后经研究发现,依靠热稳定技术能彻底阻断生物组织样本的自然变化,实现即刻以及**性组织样本的固化,保障后续针对蛋白质、多肽、以及大小分子生物标记物的高灵敏度、高准确性、极近体内(in vivo)、和原位(in situ)的分析,并依此推出了全球首款生物样本热稳仪产品,在包括顶尖制药企业、世界知名的实验室、大学、研究院及生物技术公司广泛采用,并依此在 Gene、Cell、Nature等杂志发表高端学术论文近百篇、/span>
典型用户9/span>
瑞典 Lund University、瑞 ETH Zrich Reudi Aebershold 实验室、瑞 Linkoping 大学、Finland Turku、美国哥伦比亚大学、英国曼彻斯特大学、英 Proteome Science、英 BioBank、美 U Penn、美国癌症中心、美 CDC、比利时 Antwerp 大学医院、德 Lbeck 大学、美国普渡大学、澳大利 Livestock、中国首都医科大学、丹 NovoNordisk、芬 Turku 中心、爱尔兰 Dublin 大学、日本国家癌症研究院、荷 Leiden 医科大学、英 St George Biomics 中心、美国科罗拉多大学、美 Merck、法 Sanofi、日 Takeda、美 Vanderbilt 大学、丹麦哥本哈根大学、芬兰赫尔辛基大学、德 Max-Planck 研究所、日 Tokohuso 大学医院、瑞 Karolinska 研究院、耶鲁大学、USAMRID、日本国立材料研究院、等等,用于脑、肝、胰腺、心、胸腺、等组织和异种移植、活组织检查等方面的应用、/span>
其他应用包括 Stabilizor? 用于质谱(LC-MS、MALDI-TOF、MALDI-Imaging)鉴定和定量蛋白质、多肽、及翻译后修饰;用于小分子的 MALDI-Imaging,研究药物如脂质 ATP 等在组织中的分布和代谢;用于磷酸化修饰的研究,通过固化,锁定磷酸化避免其持续性转化;用于靶标蛋白质组学分析和临床蛋白质学分析;用 2D 凝胶电泳分析及后 LCMS 分析,鉴定蛋白质在健康和疾病组织中的差异化表达;用于 Western Blot 分子生物学方法,利用抗体鉴定特殊蛋白质及其磷酸化。Stabilizor? 在临床蛋白质组学研究中,对中枢神经系统研究中的内源性多肽和磷酸化、癌症研究中的蛋白质磷酸化修饰、肥胖症及糖尿病的多肽如胰岛素及其他荷尔蒙激素和磷酸化蛋白质、心血管疾病研究中的蛋白质表达及磷酸化的作用等,均有上乘表现、/span>
原理9/span>
Stabilizor采用精密自动控温加热,通过快速热传导对酶蛋白进行不可逆改型及酶失活,保存机体内部真实的原生态,防止多肽、蛋白和小分子采样后的进行性退化。热渗透可快速(30秒)覆盖整个鲜活组织或液氮急冻过的组织或细胞培养液,均匀和充分,使样本不?*活性酶或在后续实验中发生酶激活,保障组学(如质谱等等)或生物测定手段(如Western Blot等等)检测到更多和新型的内源性肽、蛋白质,保鲜蛋白质的磷酸化修饰,真实反映大、小分子或代谢物的初始状态、/span>
固化后的样品可于当日在室温下进行组学分析或生物学测定,也可利用储存卡冷冻,避免存储及运输中可能的污染。专业的试剂盒有助于多肽、激酶以及磷酸酶的固化,确保酶彻底失活和后续分析测定结果的高度可靠性和重现性、/span>
热稳仪操作非常简便,使用者仅仅针对新鲜或冷冻的待测样品选择相应的处理程序,记时、取样,将存放了新鲜或冷冻组织样品的储存卡放入进样滑板,储存卡将被自动引入加热区,绿灯亮起时即表示固化结束、span>热固化仪非常人性化的设计是科学家和实验室技术人员非常喜爱此项技术的原因。不论是新鲜的还是经提前急冻过的组织样品,均能以Stabilizor T1进一步热固化,完善样品预处理方案和辅助圆满解决蛋白质的磷酸化修饰表征、内生肽表征、药物代谢表征等复杂流程中的生物组织处理不够稳定和不能重现的生物学难题、/span>
功能优势9/span>
和传统的固化方法如急冻法、抑制剂引入法、微波固化法等技术相比,使用 Stabilizor 系统?*去除蛋白酶和磷酸酶活性,防止蛋白质降解。降低蛋白质组复杂性,减少高丰蛋白质降解片段的干扰,增加分析和发现具有重要价值的内源性蛋白质/多肽生物标记物的可能性。Stabilizor处理样品具有稳定性、标准化和可追溯性,更易得到高质量的分析数据和“更真实、更原位、更快速” 其创新点包括9/span>
1)绿色:纯物理的样品稳定方法,不需使用干扰后期分析的酶抑制剂;无毒
2)广谱:可固化所有含水的组织?*性!无论是新鲜的还是急冻过的
3)快逞/strong>:处理时间短,一般在一分钟以内即可将样品中的各种酶类失活,快速、均匀、充刅/span>
4)精确:激光测量样本尺寸,特殊算法得出蛋白变性所需的准确能野/span>
5)智能:自由调节用于压缩样品的压力;真空抽吸避免空气干?/span>
6)重现:样品采集和储存过程标准化,结果可靠,数据更具可比性,便于进行如比较蛋白质组研穵/span>
7)持久:保留样品在活体内蛋白质的磷酸化和其它翻译后修饰的真实状态,保留不稳定、易降解的低丰度蛋白
8)灵敏:避免了样品中低丰度蛋白质或多肽受高丰度蛋白质降解片段的干扰,有助于发现新的蛋白质、多肽以及它们的修饰形式
9)便捷?*性的去除蛋白酶和磷酸酶的活性,样品经稳定后,即可在常温下、从容地、进行制备操作,无需担心酶对蛋白质、多肽的降解或改变它们的修饰形式
10)准确:降低蛋白质组的复杂程度,缩小动态范围,增加分析和发现具有重要价值的蛋白质或多肽生物标记物的可能?/span>
11)简協/strong>:使用方便,在采样的同时即可稳定样品,缩短样品离体降解的时间,避免样品污柒/span>
12)实用:使 MALDI-MSI、Western Blot、nanoLC-MS 检测目标蛋白质或多肽,Stabilizor 是目?为有效的样品稳定方法
13)溯源:所有参数均以电子记录和可U盘储存,方便管理和方法转秺/span>
主要用途包括但不限于:
快速固化新鲜或急冻过的组织样本或细胞培养液或干血斐/span>
蛋白质磷酸化修饰的表?/span>
内生肽表?/span>
药物代谢表征
暂无数据