看了全自动蛋白质免疫印迹杂交仪自动化western的用户又看了
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Western Blot 属于经验依赖性的多步骤实验,结果的优劣受到多个因素的影响,传统的手工操作容易引入误差+/p>
难以保证重复性。BlotCyclerTM 是全自动化的Western Blot 洗液工作站,自动化完成封闭、孵育、清洗和一抗回收的
一系列工作,很好地解放您的劳动力、/p>
更为重要和有意义的是?*的流体清洗可以减少二抗在膜上的附着,降低背景,提高信噪比和相对灵敏度;
自动化的操作流程避免了手工操作的误差,保证了批次内和批次间实验的重复性;高通量操作和多条件的设宙/p>
可以辅助您优化Western Blot 实验的条件,例如合适的抗体浓度、/span>
简易的操作步骤
加入洗涤缓冲液,?种不同一抗和二抗 | 放置好一抗回收管将转印膜放入样品盘并加入封闭涱/td> |
编辑程序并运衋/p>
自动化操作,可以获得更好的重复?/p>
自动化的过程相对于手工操作可以把误差降至*低,保证了重复性、/p>
如上图所示,使用BlotCyclerTM 平行处理5 张膜,检测Tubulin 和IL-2蛋白,条带信号使用分子量标准进行均一化处理,
目的条带的相对信号值在5 次实验中的偏差较小。由此可见,BlotCyclerTM 的自动化操作能够保证较好的重复?/p>
**的流体技术降低背景,提高信噪比和相对灵敏?/strong>
通过一系列对比实验发现,使用BlotCyclerTM 进行Western Blot 可以获得更低的背景值,目的蛋白质条带更加清晰锐利、/p>
如上图所示,泳道1?? 分别上样Hela 细胞的裂解液、重组的人IL-2 蛋白和前两者的混合物,加入小鼠源Tubulin
和兔源IL-2 的一抗,以及DyLight549 标记的抗鼠二抗和DyLight649 标记的抗兔二抗、/p>
设立4 组平行实验:BlotCyclerTM 4℃环境操作,手工4℃环境操作,BlotCyclerTM 室温环境操作,手工室温环境操作,
膜信号检测使用相应的荧光成像设备。不同组内蛋白条带的信号通过分子量标准品进行均一化处理、/p>
结果发现,使用BlotCyclerTM 操作所获得的IL-2 和Tubulin 的相对信号值均高于手工操作,不论是4℃还是室温环境、/p>
由此可见,BlotCyclerTM 的自动化操作确实能够降低背景值,提高信噪比和相对灵敏度、/p>
丰富的程序编写功能,人性化的设计理念、/strong>
灵活设定封闭、孵育和洗涤的时间,以及洗涤的循环数 左右两侧的样品盘可以设定不同的程序,独立控制、/p>
BlotCycler 特点总结
? 完全自动化:填充试剂后无需人工操作:/p>
? **的流体技术驱动液体,无需真空泵或空气压缩机等辅助设备:/p>
? 通量灵活? 个样品盘(每? 个),每个样品盘可使用不同的一? 二抗?多可一次处?2 张膜:/p>
? 可选配不同大小的样品盘?0 8 cm?5 10 cm:/p>
? 自动回收一抗,可以反复使用10 次;
? 程序结束后可自动完成管路清洗,去除残余试剂;
? 触摸屏程序编写,可设定多?00 个步骤,每个步骤的参数可调;
? 洗涤缓冲液可保留在样品盘内,保持膜的湿润:/p>
? 开放的系统设计,无需专用的试剂耗材:/p>
? 关键步骤和程序结束具有声音提示功能;
? 结构紧凑,占用空间小,仅30.48 30.48 cm
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