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Prominence nano 纳升液相色谱?/span>
Prominence nano系列是一套纳升LC系统,可在纳升流量下进行流速的溶剂输送。按照应用不同,可以配置?D?D系统、/span>
Prominence nano具备纳升流速下的高保留时间重复性,非常低的系统死体积和极低的交叉污染等特点、/span>
纳升流速传感器可保证精确的纳升溶剂传输
LC-20AD nano采用了新的RFC技术,可对每一个泵进行独立的流速控制,在纳升流速下保证好的流量精度?*的RFC系统是由高精度的纳升流速感应器控制,确保在任何时间的流速测量。同时,流量传感器配置了精确的温度控制机制,以减少不确定的环境因素对溶剂输送的影响。LC-20AD nano在梯度分析能保证很好的流速稳定性,?00nL/min时候保留时间重复性的RSD小于0.2%、/span>
RFC系统的原琅/span>
泵内配置了一个流速传感器,可持续监测泵输出的纳升流速。为了保证流速在设定的范围内,输液泵采用反馈控制模式,传感器的监测到真实流速后可以自动调整分流比例,从而保证流速的准确性。另外,分流后的流动相在混合前就经过回流管路回到溶剂瓶,不会浪费溶液、/span>
低溶剂消耖/span>
RFC系统可确保每个泵输出的溶剂分流后又回到流动相瓶中。就算在高压梯度分析中,两种溶剂在分离后并不会像废弃物一样排出,从而降低溶剂消耗并减少对环境的影响、/span>
FCV纳升阀,低死体?/span>
FCV nano
FCV纳升阀体积?5nL,在纳升范围内几乎不会展宽。在纳升LC使用捕集柱进样和二维系统中,FCV 纳升阀是不可或缺的。FCV 纳升阀通过使用强化的定子和聚醚醚酮的转子,可以大大降低样品的吸附,同时获得很好的耐用性、/span>
高灵敏度分析
SIL-20AC
SIL-20AC的直接进样功能与FCV纳升阀的低扩射性能相结合可实现微量体积样品的进样分析。FCV纳升阀后连接的捕集柱可以对进样的样品进行捕集浓缩,从而实现高灵敏度分析。而且,SIL-20AC被公认为交叉污染低的自动进样器,这些特征都可以满足高灵敏度MS分析的要求、/span>
2维LC的辅助控制软仵/span>
辅助控制软件可对2维LC进行便捷设置,在软件图形界面上可轻松?维HPLC的进行复杂梯度编程,设定流速等,然后生成方法文件并下载至仪器中进行控制,而图形化的流路图和梯度曲线代表当前状态。简便的设置可避免单独使用LC控制软件带来的一系列的操作问题、/span>
Prominence nano 2D系统在线的结合了离子交换和反向色谱模式(如下图所示),每种色谱模式都独立运行,两种模式的结合可进行有效的分离。Prominence nano 2D系统可与配备Nano ESI源的LCMS系统联用进行湿法蛋白组学分析,也可以与点靶仪和MALDI-TOF质谱联用进行干法蛋白组学分析、/span>
易操作的一维体糺/span>
Nano-Assist一维LC设置国/span>
1D 纳升LC系统对于确认SDS PAGE分离前的蛋白质十分有效,1D系统只需要非常简单的操作就可以实现。当然,辅助控制软件?D?D系统中使用都是十分方便的、/span>
高保留时间重复?/span>
蛋白质组分析需要比较不同样本的色谱峰差异,而样本中又存在许多特征相似的多肽,对保留时间的重复性要求非常高。Prominence nano系统的高重复性可保证蛋白质组分析的高精数据,配置了RFC系统的LC-20AD nano可以在流速为300 nL/min获得RSD不超?.2% 的保留时间重复性、/span>
牛血清白蛋白(BSA)酶解样品的重复?/span>
2 LC的高分辨玆/span>
牛血清白蛋白(BSA)酶解样品的重复?/span>
在蛋白质组学分析时,单一?D反相分离不足以提供足够的色谱峰容量;所以,为了实现复杂样品的分离,需要进?D分离以保证足够的峰容量。Prominence nano系统可以进行2D分析,结合阳离子交换和反相模式,为蛋白质组学分析提供所需的核心技术。下图为200fmol酵母蛋白质的分析图,1D分离中的未分离组分在2D中继续分离成几个组分?D分离的峰容量大大大于1D所获得的效果、/span>
分析条件
1绳/span>
柰/span> |
PolysulfoethylA (50mmL.1mmI.D.) |
流动盷/span> |
甲酸铵缓冲液 浓度STEP梯度 |
流逞/span> |
40 nL/min |
捕集柰/span> |
(5 mmL.300 ?m I.D.) L-column (micro(/span> |
捕集时长 |
5分钟 |
脱盐溶剂 |
?蚁酸=100/0.1 |
脱盐流逞/span> |
L/min |
脱盐时长 |
5分钟 |
2绳/span>
柰/span> |
PicoFrit (100 mmL.75 ?m I.D.) |
流动盷/span> |
梯度洗脱 A)?乙腈/蚁酸=98/2/0.1(v/v) B) ?乙腈/蚁酸=5/95/0.1(v/v) |
流逞/span> |
600nL/min |
温度 |
温度 |
检浊/span> |
LCMS-IT-TOF |
样本 |
酵母蛋白中的蛋白 (相当于200 fmol的) |
* 分别利用1维和2维中不同类型的柱体进行其他组合的分离模式也是可行的。在这种情况下,分离或检测方法由于使用的移动相分离模式或类型之间的相互作用,可能会有一些限制、/span>
连接MALDI-TOFMS使用
Prominence nano系统不仅仅可以通过nano ESI接口连接LCMS使用,还可连接到配有自动点靶仪的MALDI-TOFMS仪器。为了准确分析MALDI靶的每个色谱峰,需要LC能够?nL?L范围之内精确控制流速,Prominence nano系统的完全满足了此需要、/span>
酶解BSA样品的UV色谱图(500fmol(/span>
分析条件
检测器 |
UV220 nm |
柰/span> |
MonoCap for Fast-flow 快速MonoCap (250 mmL. 100 m I.D.) |
流动盷/span> |
1、水/乙腈/蚁酸=98/2/0.1(v/v) B) ?乙腈/蚁酸=5/95/0.1(v/v) 2、梯度洗脰/span> |
流逞/span> |
1 L/min |
温度 |
环境温度 |
捕捉柰/span> |
ODS (1 mmL. 0.5 mm I.D.) |
点靶间隔 |
12 秒的点断 每点液体?00nL(不包括基质(/span> |
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